產(chǎn)品簡介：

一個細胞所含的所有轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物又叫轉(zhuǎn)錄組 Transcriptome，對其進行二代測序是研究基因表達的最新方法，但是很多樣品（FACS 分離的細胞、FFPE 切片或少量細胞樣品）細胞數(shù)量有限，質(zhì)量不高，并且還沒法進行第二次取樣，所以常常需要先進行全轉(zhuǎn)錄組擴增 Whole Transcriptome Amplification。WTA的方法之一是 T7 轉(zhuǎn)錄法，它既可以得到反義 aRNA（Antisense Amplified RNA），也可以再以反義 aRNA 為模板繼續(xù)得到正義 aRNA。其制備反義 aRNA 的原理圖如下：

產(chǎn)品特點：

1.即開即用，用戶不需要單獨準備每個成分并進行優(yōu)化。

2.只需要半天即可制備反義 aRNA（相當于 mRNA 的互補 RNA 鏈），只要一天即可制備正義 aRNA（相當于 mRNA）。

3.以 50ng mRN 為模板一般能制備 10ug 左右的、長度在 200-1500bp 之間的反義 aRNA；以 50ng aRNA 為模板一般能制備 40ug 左右的、長度在200-1000bp 之間的正義 aRNA。

4.能保持 RNA 樣品中各分子的相對豐度， Pearson 相關性系數(shù)一般在0.9-0.95 以上（跟起始模板用量、制備的是反義還是正義 aRNA 相關）。

5.體外轉(zhuǎn)錄時加入自備的標記 UTP，可以制備標記的 aRNA。

6.擴增得到的單鏈 RNA 能直接用于各種后續(xù)試驗，包括 NGS、qRT-PCR、芯片表達分析、雜交反應等。

7.本產(chǎn)品足夠做 20 次全轉(zhuǎn)錄組擴增（制備反義 aRNA 算一次，再制備正義aRNA 算兩次）。

8. 全轉(zhuǎn)錄組擴增試劑盒（T7 法）只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

本產(chǎn)品使用塑料袋包裝，含兩個部分第一部分無包裝

名稱編號規(guī)格包裝

微量核酸沉淀劑10mL10mL 本色瓶內(nèi)

使用手冊 1 份無

第二部分用 10 孔盒包裝

名稱編號規(guī)格包裝

cDNA 第一鏈合成反應液

（含 dNTP）40 μL0.5 mL 綠蓋管

T7-Oligo-dT 引物干粉20 此1.5mL 本色管

MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶，200U/μL20 μL0.5 mL 紅蓋管

5×cDNA 二鏈合成緩沖液160 μL0.5 mL 白蓋管

20×cDNA 二鏈合成酶混合液40 μL0.5 mL 黃蓋管

E.coli 外切酶 I，20U/μL40 μL0.5 mL 紅蓋管

微量核酸沉淀劑10mL10mL 本色瓶內(nèi)

2×T7 體外預配液

0.5 mL0.5 mL 綠蓋管

T7 RNA 聚合酶-RI 混合液

50 μL0.5 mL 紅蓋管

RNase-free 水1 mL1.5 mL 藍蓋管

保存和運輸

低溫運輸，-20℃保存，有效期為 1 年。

自備試劑

75%乙醇，RNA 純化試劑盒，RNase-free DNase

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