產品簡介：

十二烷基*-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）不僅可用于檢測蛋 白質的相對分子質量，而且也是分離純化蛋白質的重要工具之一，隨著蛋白質技術的微量化，有必要從凝膠中回收蛋白質以用于制備抗體、免疫印跡、氨基酸組分分析或末端序列測定等。本產品就是專門為此用途開發的中量蛋白膠回收法。

產品特點：

1.簡單，不需要復雜而昂貴的儀器（如電洗脫儀）。

2.適用于變性 PAGE 膠（如 SDS-PAGE）和非變性 PAGE 膠。

3.每次可以處理 1 g 的 PAGE 膠（具體含多少蛋白質取決于上樣的濃度）。

4.回收率一般在 50-90%之間（跟蛋白質親水性、大小、洗脫時間相關）。

5.跟后續的實驗兼容，包括 2-D 電泳、質譜測序、EMSA 或其它活性檢測實驗等。

6.蛋白膠中量回收試劑盒（沉淀法）只能用于科研。

產品參數：

產品規格

成份規格包裝

蛋白膠中量純化溶液 A5mL5 mL 本色瓶

蛋白膠中量純化溶液 B50 mL50 mL 本色瓶

20mL 塑料注射器5 只塑料袋

使用手冊1 份無

保存和運輸

常溫運輸和保存，有效期一年。

自備試劑

無

使用方法：

1.按常規方法進行變性（SDS-PAGE）或非變性 PAGE 蛋白電泳。

2.切取含目的蛋白條帶的 PAGE 膠（盡可能地把多余的膠切除，否則會影響回收效率）。注意：PAGE 膠固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建議把樣品分多孔上樣，電泳后只切其中一個樣孔的膠條進行固定和染色，  然后將此膠條放回到在整體膠中原來的位置，通過顯色膠條上的蛋白條帶找到在未染色膠上對應區域，并切下此區域的膠進行回收。

3.將切下的、重量不超過 1 克的膠塊轉移到 20 mL 塑料注射器中（不安裝針頭）。用塑料注射器推桿將膠塊從端口擠壓出去，使之變成細小的碎片，  用自備的 15mL 塑料離心管收集這些破碎的凝膠顆粒。也可用其他方法搗碎 PAGE 膠條，包括液氮研磨。膠條越碎，蛋白回收率越高。

4.加入 1 mL 蛋白膠中量純化溶液 A，4℃脫色搖床上搖晃洗脫至少 16 小時（過夜）。此期間最好將蛋白膠中量純化溶液 B 放在-20℃冰箱預冷待用。

5.10,000 g 離心 10 分鐘，轉移上清（含回收蛋白）到新的 10-15mL 的塑料離心管中，注意不要吸取 PAGE 膠碎片。

6.加入 5 倍體積的預冷的蛋白膠中量純化溶液 B，搖晃混勻。

7.-20℃放置至少 30 分鐘。

8.室溫 12,000 g（注意：一定要檢查使用的離心管是否能夠耐受此離心力， 如果不能建議將溶液分到 1.5 mL 的塑料離心管中再在臺式離心機上進行離心處理）離心 20 分鐘，小心棄上清，不要吸走沉淀。

9.室溫充分晾干，得到的沉淀即為回收的蛋白質。回收的蛋白質可溶解在跟

后續測試兼容的緩沖液中，直接用于后續實驗（2-D 電泳、質譜測序等）。

選擇我們的蛋白膠中量回收試劑盒（沉淀法），就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！