產品簡介：

4×LAMP MasterMix 含有 LAMP 擴增所需的所有成分，可以用于 LAMP 等溫擴增。LAMP 即 Loop-Mediated Isothermal Amplification（環介導等溫擴增），它利用 4 條模板專一的特異引物和具有鏈置換能力的 Bst DNA 聚合酶 2.0(8 U/μL)，在等溫條件下(65℃左右) 30－60 分鐘完成 LAMP 擴增。該技術在靈敏度、特異性和檢測范圍等指標上能媲美甚至優于定性 PCR 技術，同時還不需要昂貴的儀器設備。目前已成功應用于生物的快速檢測，廣泛用于各個領域。

產品特點：

1.即開即用，含有紅色電泳示蹤劑，擴增后可以直接上樣，不需要上樣液。

2.4×濃度，提供更多的加樣品的空間，可以增加檢測機率。

3.高特異性，精心優化的配方，非特異擴增比自配的試劑更低。

4.高擴增效率，一般比PCR 靈敏一個數量級。

5.65℃左右等溫擴增，不需要貴重儀器。

6.本試劑盒足夠 50 次 20 μL 體系的 LAMP 擴增。

7.提供擴增對照，便于在遇到困難時分析原因。

8.4×LAMP MasterMix（電泳法）只能用于科研，不能用于臨床。

產品參數：

產品規格

成分規格包裝

4×LAMP MasterMix

（含電泳示蹤劑，待加酶）200 μL0.5 mL 白蓋管

Bst DNA 聚合酶 2.0(8 U/μL)50 μL0.5 mL 紅蓋管

陽性對照模板-引物混合物50 μL0.5 mL 藍蓋管

使用手冊1 份無

保存和運輸

低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

DNA 模板、LAMP 引物

使用方法：

1.制備模板DNA：用于選用合適的方法制備模板DNA。如果有N個樣品，最好設置N+2個樣品制備，多出的兩個一個是樣品制備陽性對照，一個是樣品制備陰性對照。

2.配制5×LAMP引物混合液

先加超純水將合成的HPLC級別的下列引物干粉稀釋到下表所標注的母液 濃度，然后在一新的離心管中按表中所列體積加入各種引物母液和超純水，最后得到1 mL的5×LAMP引物混合液，此混合液足夠250次20 μL體系的 LAMP擴增。如果需要配制的5×LAMP引物混合液體積異于1  mL，則各成分的用量請按比例調整。引物混合液可以在-20℃放置2年。

注：如果沒有Loop引物，則用超純水補足其體積。

3.在冰上融化4×LAMP MasterMix（待加酶），混勻，稍離心。第一次使用時， 請將50 μ L Bst DNA 聚合酶2.0(8 U/ μ L) 全部加入到4 × LAMP MasterMix中并輕柔混勻至少1分鐘，然后再使用。如果有N個樣品，則在 N+2個反應管中加入以下組份，多出的一管是LAMP擴增陽性對照（PC）， 一管是LAMP擴增陰性對照（NC）：

4.混勻，置于65℃保溫60分鐘。如果是在PCR儀中保溫，必須加熱蓋。如果用金屬浴或水浴保溫，沒有熱蓋，必須覆蓋50 μL的自備石蠟油，否則保溫期間反應體系的水分會蒸發，會嚴重影響反應效率。

5.擴增結束后取5-10 μL擴增產物直接上樣（本產品含有紅色電泳示蹤劑，不需要再加上樣液，紅色示蹤劑的泳動速度相當于50 bp的DNA）進行2-3% 的瓊脂糖凝膠電泳，有LAMP擴增的樣品將可見LAMP特征性DNA梯度電泳

6. 結果分析：如果本試劑盒提供的陽性對照-引物混合物能夠擴增而陰性對照不能擴出，則實驗有效。如果陽性對照-引物混合物沒有擴增出條帶，則試劑盒的問題，請跟廠家聯系。如果陰性對照（水作為模板）有擴增出條帶， 則說明LAMP樣品或試劑有過去的擴增產物的污染，需要注意操作的規范 性，如果不能解決，可以重新設計LAMP引物擴增新的靶片段。

選擇我們的4×LAMP MasterMix（電泳法），就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案，為您的科研實驗保駕護航！