產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本產(chǎn)品是單堿基延伸（Single Base Extension，SBE）試劑盒，用于測(cè)定核酸中特定位置的堿基，常跟質(zhì)譜等能分辨一個(gè)堿基差異的后續(xù)研究結(jié)合使用。在進(jìn)行 SBE 反應(yīng)中，SBE 引物與靶核酸樣品雜交。在聚合酶和雙脫氧核苷酸的作用下， SBE 引物的 3’末端以靶分子為模板延伸一個(gè)堿基。如果該靶位點(diǎn)有突變，則延伸一個(gè)堿基，因此它們的分子量將有一個(gè)堿基的差異，這個(gè)分子量差異可以通過質(zhì)譜等方法檢測(cè)出來。SBE 技術(shù)的示意圖如下：

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.即開即用，不用自行優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。

2.選擇專一的 SBE 專用 DNA 聚合酶，專一性強(qiáng)，非特異添加率低。

3.提供 4 種 ddNTP，方便用戶檢測(cè)所需的任何位點(diǎn)；ddATP、ddCTP、ddTTP 及 ddGTP 的分子量分別為：541.13、517.10、532.11 及 557.13。

4.跟后續(xù)的質(zhì)譜（如 MALDI-TOF）等檢測(cè)方法兼容。

5.本產(chǎn)品足夠 100 次單堿基延伸。

6.單堿基延伸試劑盒只可用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

產(chǎn)品規(guī)格

成份編號(hào)規(guī)格包裝

ddATP Solution，1mM100μL0.5 mL 白蓋管

ddTTP Solution，1mM100μL0.5 mL 本色管

ddGTP Solution，1mM100μL0.5 mL 藍(lán)蓋管

ddCTP Solution，1mM100μL0.5 mL 紫蓋管

SBE 專用 DNA 聚合酶100μL0.5 mL 紅蓋管

10×SBE 緩沖液100μL0.5 mL 綠蓋管

SBE 終止液（EDTA 0.2mM）100μL0.5 mL 黃蓋管

使用手冊(cè)1 份無

保存和運(yùn)輸

低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

SBE 模板，SBE 引物。

使用方法：

1.在 0.2 mL 微量離心管中按下表設(shè)置一個(gè) 10 μL 體系的 SBE 反應(yīng)（如果需要標(biāo)記更多探針，請(qǐng)?jiān)黾訕?biāo)記體積而不要增加探針 DNA 的濃度）：

成份用量

自備 SBE 模板25 μM

自備 SBE 引物

（如果 3’端第一個(gè)共價(jià)鍵使用硫代 Phosphorothioate修飾，則修飾引物比常規(guī)引物專一性更強(qiáng)）10 μM

四種 ddNTP 選一種1 μL

10×SBE 緩沖液1 μL

補(bǔ)超純水到 9 ?L-

SBE 專用 DNA 聚合酶1 μL

合計(jì)10 μL

2.37℃反應(yīng) 3 小時(shí)。一定要使用熱蓋已經(jīng)開啟的 PCR 儀進(jìn)行保溫。

3.加入 1 ?L SBE 終止液（EDTA 0.2mM），吹打混勻。

4.95℃反應(yīng) 5 分鐘滅活酶。

5.去除鹽離子和蛋白之后，可以用于后續(xù)的 MALDI-TOF。本產(chǎn)品不含相關(guān)試劑。

選擇我們的單堿基延伸試劑盒，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！