多糖多酚植物RNA提取试剂盒（过柱法）得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR、RT-LAMP、Northern 杂交、cDNA 合成等后续实验。

产品简介：

本产品是本公司根据很多植物多糖多酚的特点而专门开发的 RNA 纯化试剂盒，其提取纯化效果在 100 多种各类植物中得到验证。

产品特点：

1.操作更加简单快速，处理一个样品只需要约十分钟。

2.所得到的 RNA 平均 OD260/280 在 2.0 左右。

3.含有专门去除多糖和多酚的成分，污染残留少。

4.得到的 RNA 可直接用于 RT-PCR、RT-LAMP、Northern 杂交、cDNA 合成等后续实验。

5.性价比高于进口的柱式植物 RNA 提取产品。

6.本产品不适合纯化植物小RNA。

7.多糖多酚植物RNA提取试剂盒（过柱法）只能用于科研。

产品参数：

成分规格包装

植物 RNA 提取溶液 A50 mL60 mL 本色瓶

植物 RNA 提取溶液 B15 mL15 mL 棕玻瓶

植物 RNA 提取溶液 C50 mL60 mL 本色瓶

离心吸附柱50 套塑料袋

通用洗柱液50 mL60 mL 本色瓶

RNA 洗脱液10 mL10 mL 本色瓶

使用手册1 份无

运输及保存

常温运输和保存，溶液 B 需要 4℃保存，有效期一年。

自备试剂

氯仿。

使用方法：

注意：植物 RNA 提取溶液 A 在 4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻-底溶解并充分摇匀后才能取用。

1.每次微量提取需要 100-200 mg 植物叶片、或 50-100 mg 植物种子、或

200-500 mg 植物果实。

2.样品破碎：

1)匀浆法：先将新鲜植物组织-剪切成小块，放入 10-15 mL 塑料离心管中，加入 1 mL 植物 RNA 提取溶液 A，然后用Polytron 剪切式匀浆器匀浆 5-20秒，然后见匀浆液转移到 1.5mL 塑料离心管中。匀浆时会产生泡沫，但不影响提取效果。不能用玻璃的、分离线粒体和叶绿体的匀浆器。

2)液氮研磨法（适用于复杂，易降解样品）：取适量新鲜植物组织放入含液氮的研钵中，迅速将组织研磨成粉末后，将粉末转移到 1.5 mL 的塑料离心管中，加入 1 mL 植物 RNA 提取溶液A，立即剧烈振荡 20 秒，充分混匀。

3.在装有匀浆液或研磨物的 1.5mL 离心管中加入 0.3 mL 的植物RNA 提取溶液B 和 0.2 mL 自备氯仿，在振荡器上振荡 30 秒混匀，此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。

4.室温 13000 g 离心 5 分钟，两相间将有约 5-10 毫米厚的细胞破碎物。

5.将上清液(约 0.6 mL)转移到另一干净的 1.5 mL 塑料离心管中，下层有机相和中间层含有 DNA、蛋白质和其他杂质，避免触及或吸取。

6.加入等体积的植物 RNA 提取溶液 C，充分颠倒混匀。如果有沉淀产生（对某些植物，属于正常现象），千万不要去掉沉淀。

7.将一半的溶液（如果有沉淀，则先混匀后一起取用）转移到离心吸附柱中，13000  g 室温离心半分钟，弃穿透液。

8.将剩下的一半溶液（如果有沉淀，则先混匀后一起取用）转移到同一离心吸附柱中，13000 g 室温离心半分钟，弃穿透液。

9.加 0.7 mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。再加 0.3 mL 通用洗柱液， 室温离心半分钟，弃穿透液。

10.室温离心半分钟。此步十分重要，否则残留的洗柱液会影响 RNA 的使用。

11.将离心吸附柱转移到一个自备的干净的RNase-free 收集管中，加入 50 μL RNA

洗脱液，室温放置 1 分钟。

12.13000 g 室温离心半分钟，离心管中溶液即为 RNA 样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

13.RNA 完整性的电泳检测：如果需要做 Northern 杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳，因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子（BioTechniques， 28：414，2000）。如果电泳发现 DNA 污染严重（跟样品相关）建议使用含有RNase-free DNase 处理步骤的植物 RNA 纯化试剂盒（过柱法，含 DNase），也可以另购 RNase-free DNase 降解 DNA。

14.RNA 产量产率测定：将 1μL RNA 跟 1uLTE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)混合，然后在 NanoDrop 上测其在 OD260 的光吸收和浓度，进而计算出 RNA 的产量

（浓度×体积)和产率(RNA 产量/植物组织用量)。

15.RNA 纯度测定：无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 1.8-2.1 之间，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR 等反应。

选择我们的多糖多酚植物RNA提取试剂盒（过柱法），就是选择精准、高效、可靠的检测方案，为您的科研实验保驾护航！