豬流行性腹瀉病毒IgG ELISA抗體檢測(cè)試劑盒

保存條件及有效期

1．試劑盒保存：2-8℃。

2．有效期：12個(gè)月

產(chǎn)品組成

成分含量

（1） 抗原包被板（96孔/塊）2塊

（2） 陽(yáng)性對(duì)照1ml/管 × 1管

（3） 陰性對(duì)照1ml/管 × 1管

（4） 酶結(jié)合物20ml/瓶 × 1瓶

（5） 樣品稀釋液50ml/瓶 × 2瓶

（6） 10倍濃縮洗滌液50ml/瓶 × 2瓶

（7） 底物顯色液20ml/瓶 × 1瓶

（8） 終止液10ml/瓶 × 1瓶

（9） 樣品稀釋板（96孔/塊）2塊

（10）說(shuō)明書(shū) 1份

注意事項(xiàng)

（1）實(shí)驗(yàn)前，將試劑盒取出置25℃±3回溫，至少30分鐘，實(shí)驗(yàn)完成后置2～8℃保存。

（2）若試劑盒陰陽(yáng)性對(duì)照、酶標(biāo)記物出現(xiàn)少量懸浮物，屬正?，F(xiàn)象。

（3）請(qǐng)?jiān)?strong>豬流行性腹瀉病毒IgG ELISA抗體檢測(cè)試劑盒規(guī)定的有效期內(nèi)使用；禁止非同批試劑盒混用。

（4）沒(méi)有用完的抗原包被板應(yīng)貯存在密封塑料袋內(nèi)，置2～8℃存放。

（5）避免底物液暴露于強(qiáng)光，避免接觸氧化劑。

（6）濃縮洗滌液用蒸餾水或純水稀釋?zhuān)绻l(fā)現(xiàn)有結(jié)晶加熱使其溶解后再使用。

（7）嚴(yán)格按照操作程序，仔細(xì)的吸液、計(jì)時(shí)，充分洗滌，對(duì)于獲得精確的結(jié)果是非常必要的。

（8）使用樣品稀釋板將所有待檢血清稀釋好，再進(jìn)行檢測(cè)。

操作步驟

1  用法

1.1  樣品準(zhǔn)備  取動(dòng)物全血，4000r/min離心10分鐘，收集上清?；虿杉?，待凝固后自然析出血清。血清清亮，無(wú)溶血。

1.2  樣品稀釋  將待檢血清樣品在樣品稀釋板中按1:40的比例稀釋?zhuān)ɡ纾涸跇悠废♂尠逯邢燃尤?95μl樣品稀釋液，加5μl待檢血清。不同的樣品要注意換吸頭。樣品在稀釋過(guò)程中要充分混勻。陰性、陽(yáng)性對(duì)照不稀釋?zhuān)苯邮褂谩?/p>

1.3  洗滌液配制  10倍濃縮洗滌液使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫（20~25℃），然后用蒸餾水或純水作10倍稀釋?zhuān)靹颍ɡ纾?0ml的濃縮洗滌液加上90ml純水）。

1.4  操作步驟

1.4.1  取抗原包被板（根據(jù)樣本多少，可拆開(kāi)分次使用），每孔加入稀釋好的樣本100μl；另外設(shè)陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照各2孔，100μl/孔。置37℃孵育30分鐘。

1.4.2  棄去板中液體，每孔加入稀釋好的洗滌液300µl，棄掉孔中洗滌液，重復(fù)洗滌5次，拍干。

1.4.3  每孔加入100μl酶結(jié)合物，輕微振蕩混勻。置37℃孵育30分鐘。

1.4.4  棄去板中液體，洗滌5次，方法同1.4.2。

1.4.5  每孔加底物顯色液100µl，室溫（20~25℃）避光顯色10分鐘。

1.4.6  每孔加終止液50µl。10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定并記錄各孔在630nm波長(zhǎng)處的吸光度（OD）值（測(cè)定前輕輕振勻，勿溢出）。

2  判定

2.1  成立條件  在酶標(biāo)儀上測(cè)各孔的OD630nm值。試驗(yàn)成立的條件是：陰性對(duì)照孔平均OD630nm值應(yīng)＜0.5，陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD630nm值應(yīng)＞0.5。

2.2  判定標(biāo)準(zhǔn)  

    S為樣品孔OD630nm值，P為陽(yáng)性對(duì)照孔平均OD630nm值，計(jì)算樣品S/P值。

若S/P值≥0.2時(shí)判為陽(yáng)性；若S/P值＜0.2時(shí)判為陰性。