產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

eccDNA 就是 extrachromosomal circular DNA（染色體外環(huán)狀 DNA）的簡(jiǎn)稱，它們是從正常基因組中分離或脫落下來，游離于染色體基因組之外的環(huán)  狀 DNA，含量非常低，長(zhǎng)度主要分布在 0.1-5kb 之間，99%小于 25kb。近年來研究表明，eccDNA 往往在腫瘤和衰老過程中富集，以特殊的方式參與腫瘤和衰老的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程。在大部分人類癌癥細(xì)胞中 eccDNA 廣泛存在，且它的富集通常會(huì)促進(jìn)癌基因的擴(kuò)增，從而增加了癌基因的可塑性和不穩(wěn)定性，因此其對(duì)  腫瘤細(xì)胞的進(jìn)化可能存在重要的意義。但是純化 eccDNA，尤其是純化測(cè)序級(jí)的eccDNA 一直是個(gè)難題，為此本公司精心開發(fā)出了包埋法 eccDNA 純化技術(shù)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

1.即開即用，起始材料最好為貼壁或懸浮培養(yǎng)細(xì)胞、實(shí)體組織、白細(xì)胞。如果  是實(shí)體組織或冷凍組織，效果稍差。

2.采用包埋法純化，極大程度抑制了細(xì)胞核 DNA 的污染。

3.采用沉淀法純化，避免采用磁珠和過柱純化，防止了短 eccDNA 的丟失。

4.采用酶切去除人線粒體 DNA，降低其對(duì) eccDNA 分析的干擾。

5.采用熒光染料法滾環(huán)擴(kuò)增 RCA 試劑盒，進(jìn)一步富集 eccDNA。

6.使用非生物源性的核酸助沉劑，避免了外源核酸對(duì) RCA 和測(cè)序的干擾。

7.足夠 25 次 eccDNA 純化和擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)，一次純化可以處理 2E7 個(gè)細(xì)胞。

8.包埋法 eccDNA 純化及擴(kuò)增試劑盒只能用于科研。

產(chǎn)品參數(shù)：

本產(chǎn)品第一部分，大扁盒包裝，常溫運(yùn)輸和保存

本產(chǎn)品第二部分，十孔盒包裝，低溫運(yùn)輸，-20℃保存

名稱規(guī)格包裝

蛋白酶 K 溶液，10mg/mL 500?L0.5mL 黃蓋管

超純水 1mL0.5mL 藍(lán)蓋管

10×人 mtDNA 內(nèi)切酶緩沖液 0.5mL0.5mL 綠蓋管

人 mtDNA 內(nèi)切酶 25?L0.5mL 紅蓋管

RCA 專用隨機(jī)引物干粉 25 次0.5mL 白蓋管

Phi29 DNA 聚合酶，10U/?L 13?L0.5mL 紅色管

10×Phi29 DNA 聚合酶

緩沖液 ???L0.5mL 綠色管

dNTP-染料混合液 37.5?L0.5mL 白蓋管

使用手冊(cè) 1 份無

運(yùn)輸及保存

第一部分需要常溫運(yùn)輸和保存，第二部分需低溫運(yùn)輸和-20℃保存，有效期一年。

自備試劑

自備 PBS、瓊脂糖，75%乙醇

使用方法：

整個(gè)過程所需溶液和設(shè)備（Dounce 玻璃勻漿器）均需提前半小時(shí)將其放冰上預(yù)冷，下面的步驟所述溶液均是預(yù)冷液。

選擇我們的包埋法 eccDNA 純化及擴(kuò)增試劑盒，就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測(cè)方案，為您的科研實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航！